Glyphosate selection of maize transformants containing CP4epsps gene

Nitovska, I.O. and Morgun, B.V. and Abraimova, O.Ye. and Satarova, T.M. (2020) Glyphosate selection of maize transformants containing CP4epsps gene. Фактори експериментальної еволюції організмів, 26. pp. 239-244. ISSN ISSN 2415-3826 (Online), ISSN 2219-3782 (Print).

[img] Text
Abraimova_article.pdf

Download (840kB)

Abstract

Дослідити умови селекції трансформантів кукурудзи, які б містили ген СР4epsps, з використанням гліфосату в якості селективного агенту. Методи. Культура тканин in vitro, Agrobacterium-опосередкована трансформація, селекція трансгенних рослин, виділення загальної ДНК рослин, аналіз рослинної ДНК методом полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР). Результати. Продуковано морфогенний калюс кукурудзи з незрілих зародків гібрида (PLS61)R2×PLS61, який має високу частоту регенерації (до 95%), що зберігається впродовж тривалого культивування. В результаті Agrobacterium-опосередкованої трансформації морфогенного калюсу та селекції трансгенного матеріалу з використанням гліфосату були отримані трансформанти кукурудзи, які містили ген СР4epsps з частотою 1 %. Висновки. Генотип кукурудзи (PLS61)R2×PLS61 є перспективним для досліджень з генетичної трансформації, зокрема отримання трансгенної кукурудзи, стійкої до гербіциду гліфосату. Використання морфогенного калюсу кукурудзи (PLS61)R2×PLS61 та гліфосату в якості селективного агенту в концентрації 0,1 мМ та 0,25 мМ у середовищах для калюсогенезу і 0,01 мМ у середовищі для регенерації виявилось ефективним для відбору трансгенних рослин з геном СР4epsps. To study the selection conditions of maize transformants containing the CP4epsps gene using glyphosate as a selective agent. Methods. Tissue culture in vitro, Agrobacterium-mediated transformation, selection of transgenic plants, isolation of total plant DNA, analysis of plant DNA by polymerase chain reaction (PCR). Results. The morphogenic maize callus of immature embryos of the hybrid (PLS61)R2×PLS61 was produced, which had a high regeneration rate (up to 95%), that persisted over long cultivation. Agrobacteriummediated transformation of the morphogenic callus and selection of the transgenic material using glyphosate yielded maize transformants containing the CP4epsps gene at a frequency of 1%. Conclusions. Maize genotype (PLS61)R2×PLS61 is promising for studies on the maize genetic transformation, in particular for the production of transgenic maize resistant to glyphosate herbicide. The use of morphogenic maize callus (PLS61)R2×PLS61 and glyphosate as a selective agent at a concentration of 0.1 mM and 0.25 mM in media for callusogenesis and 0.01 mM in the medium for regeneration was effective for the selection of transgenic plants with the gene CP4epsps.

Item Type: Article
Additional Information: https://doi.org/10.7124/FEEO.v26.1273
Uncontrolled Keywords: Zea mays L., морфогенний калюс, Agrobacterium-опосередкована трансформація, ПЛР, генетична інженерія,Zea mays L., morphogenic callus, Agrobacterium-mediated transformation, PCR, genetic engineering.
Subjects: Biological Chemistry
Divisions: Departments > Department of Biochemistry and medical chemistry
Depositing User: Оксана Мажуга
Date Deposited: 29 Mar 2021 08:42
Last Modified: 29 Mar 2021 08:42
URI: http://repo.dma.dp.ua/id/eprint/6379

Actions (login required)

View Item View Item